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3D细胞培养、类器官培养

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传统的2D细胞培养体系虽然有很多优点,但这些模型缺乏维持原位细胞特性,无法反应细胞与细胞,细胞与基质之间的互相作用。通过纯化分离所得的原代细胞在体外2D培养之后也会失去其原有的功能和特性,3D细胞培养的出现很好的解决了这些问题。

 

【3D细胞培养】

LONZA全新细胞培养系统 3D细胞培养系统

----RAFTTM 将细胞包被于I型胶原蛋白中,RAFTTM Absorber可用于浓缩并构建精确控制的高密度胶原支架,为细胞提供更接近于体内的环境。已知的建立的RAFTTM 3D细胞培养模型有胰岛模型、角膜模型、肿瘤共培养模型、呼吸系统模型、神经系统模型(血脑屏障)、肝脏模型。

 

----RAFTTM可以支持单一细胞类型培养或多种细胞类型的共培养。

 

 单细胞3D培养模型(细胞处在胶原表面和胶原中) 

四种细胞共培养模型

    

Lonza 提供不同种类的原代细胞(部分如下)

品牌

产品名称

货号

规格

描述

LONZA

正常成人表皮角质形成细胞NHEK-Ad

CC-2501

≥500,000 cells/ampo

配套培养基00192060

LONZA

正常人新生儿表皮角化细胞NHEK-Neo

CC-2503

≥500,000 cells/ampo

配套培养基CC-3111

LONZA

人肺成纤维细胞NHLF

CC-2512

≥500,000 cells/ampo

配套培养基CC-3132

LONZA

人冠状动脉平滑肌细胞CASMC

CC-2583

≥500,000 cells/ampo

配套培养基CC-3182

LONZA

人冠状动脉内皮细胞HCAEC

CC-2585

≥500,000 cells/ampo

配套培养基CC-3202

LONZA

人主动脉内皮细胞HAEC

CC-2535

≥500,000 cells/ampo

配套培养基CC-3162

LONZA

正常人支气管/气管上皮细胞NHBE

CC-2540/2541

≥500,000 cells/ampo

配套培养基CC-3170

LONZA

正常人星形胶质细胞NHA

CC-2565

≥500,000 cells/ampo

配套培养基CC-3186

LONZA

人肝细胞

CC-2591

3 – 6 × 106 viable

配套培养基CC-3198

LONZA

人脐带血 CD4+ T Cells (冻存)

2C-200

≥20 million cells

配套培养基CC-3211

 

基质胶细胞培养系统 

BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。

 

示意图

 

3D细胞培养相关产品

品牌

产品名称

货号

描述

LONZA

RAFT™ Absorbers for 24-well plate, 48 qty

016-1R32

48个24孔板孔径样式的
吸收塞

LONZA

RAFT™ Insert Absorbers for 24-well plate, 48 qty, for inserts

016-1R33

48个24孔板孔径样式的
插入吸收塞

LONZA

RAFT™ Plate Kit, 4 x 96 -well clear plate & 4 x 96-well absorber

016-0R92

4×96孔板孔径样式的
吸收塞

LONZA

RAFT™ Reagent Kit

016-0R94

1 x  瓶I型胶原≥ 100 mL
1 x 瓶 10X MEM ≥ 15 mL
1 x 瓶 中和溶液≥ 10 mL
4 x 混合瓶

LONZA

RAFT™ 96-well bundle kit (contains 016-0R94 & 016-0R92)

016-1R10

 包含货号016-0R94 和
货号016-0R92

LONZA

RAFT™ 24-well bundle kit, contains (016-0R94 & 016-1R32)

016-1R24

包含 货号016-0R94 和
货号016-1R32

LONZA

RAFT™ 24-well Insert bundle kit (contains 016-0R94 & 016-1R33)

016-1R25

 包含货号016-0R94 和
货号016-1R33

LONZA

RAFTTM 24-Well Small Kit, 3D Reagents & 24-Well Absorbers - 12 Reactions

016-1R16

12个反应和12个24孔板孔径样式的吸收塞

LONZA

RAFTTM 96-Well Small Kit, 3D Reagents and 1 x 96-Well Plate and Absorbers

016-1R17

1×96孔板孔径样式的吸收塞

LONZA

RAFTTM 24-Well Small Transwell Kit, 3D Reagents and Transwell Absorbers - 12 Reactions

016-1R18

12个反应,12个24孔板孔径样式的插入吸收塞

BD BioCoat

基底膜基质(低生长因子)

356230

5ML

BD BioCoat

人胚胎干细胞专用的基底膜基质

354277

5ML

BD BioCoat

基底膜基质不含酚红,无LDEV

356237

10ML

BD BioCoat

基质胶(高浓度)

354248

10ML

 

【3D类细胞培养】

类器官(organoids)-- 通过在体外培养胚胎或成体干细胞,让其增殖分化形成具有一定形态结构及功能的类似于器官的3D细胞团结构。这些细胞结构虽然不是真正意义上的人类器官,但能在结构和功能上模拟真实器官,因此,其在科学研究中发挥着越来越重要的作用。

 

现有的3D培养的球体形成实验:往往缺乏能自我增殖及分化的干细胞和祖细胞。

 

常用的各种动物模型:在某种程度上虽然能模拟人的生理状况,但是由于各种不确定变量的出现,通量的限制,人和动物生理的差别导致动物模型还是有所缺陷,因此需要构建一种能够弥补以上缺陷的生物模型,而3D类器官则完美符合了这种模型的需要。

 

 膀胱类器官

肾类器官

 

类器官培养流程

类器官3D培养基本过程:将永生化的细胞系、原代细胞系、干细胞或外植体等放在基质胶中,以模拟细胞体内生长环境的体外培养方法,然后添加各种生长因子和小分子化合物来诱导分化成不同的类器官。

 

小肠类器官的培养流程

3D类器官培养基质胶

产品

产品名称

产品编号

规格

描述

R&D

Cultrex® PathClear Basement Membrance Extract

3432-010-01

2×5ml

通用型

R&D

Cultrex® Organoid Qualified,Reduced Growth Factor Basement Membrance Extract(Type2),PathClear®

3533-010-02

2×5ml

低生长因子。适合生长旺盛细胞和嵌入法。为肠道和肝脏类器官最佳基质

 

3D类器官培养优质蛋白和小分子产品

针对不同类器官的培养提供方案

peprotech和absin产品种类齐全   细胞因子和重组蛋白(PeproTech)、小分子和激素(absin)。

peprotech是Hans Clevers 类器官研究的先行者的提供者   首个可长期培养的类器官 (小鼠小肠类器官)中使用PeproTech的Noggin和EGF,后期制备的各种类器官也均使用PeproTech的细胞因子和蛋白。

PeproTech提供世界上最好的R-Spondin 1   生物活性高,稳定。

 

 

不同类器官培养应用的生长因子和小分子

类器官

生长因子

小分子

小肠/结肠类器官

 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a

A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632

胃类器官

FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a

A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632

肝脏类器官

BMP-4、EGF、FGF-basic、FGF-10、HGF、Noggin、Wnt-3a


A 83-01、DAPT、Forskolin、Gastrin、Nicotinamide、
Y 27632、Prostaglandin E2

肺类器官

Activin A、FGF-basic、FGF-4、Noggin

CHIR 99021、SB 431542

前列腺类器官

EGF、Activin A、FGF-basic、FGF-10、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-10b

A 83-01、SB 202190、Y 27632、Prostaglandin E2、Nicotinamide、Testosterone

胰腺类器官

FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a

A 83-01、Nicotinamide、Gastrin

肾类器官

 BMP-2、BMP-4、BMP-7、FGF-basic、FGF-9

CHIR 99021、Retinoic Acid

乳腺类器官

Heregulinβ-1、R-Spondin 1、R-Spondin 2、Noggin、EGF、 FGF-basic、FGF-10、Wnt-3a

Prolactin、Y 27632

脑类器官

 FGF-basic、Noggin、DKK-1、 EGF、BDNF、GDNF

MK-2206、GDC-0068、Dorsomorphin、Y 27632

视网膜类器官

SHH、Wnt-3a

CHIR 99021、Y 27632

内耳类器官

BMP-4、 FGF-basic

A 83-01、SB 431542

 

类器官培养相关产品

品牌

产品名称

产品编号

规格

PeproTech

Human EGF

AF-100-15

100ug/500ug

PeproTech

Human Noggin

120-10C

5ug/20ug

PeproTech

Human R-Spondin 1

120-38

5ug/20ug

PeproTech

Murine Wnt-3a

315-20

2ug/10ug

PeproTech

Human FGF-10

100-26

5ug/25ug

PeproTech

Human BMP-4

120-05ET

2ug/10ug

PeproTech

Human FGF-basic

100-18B

10ug/50ug

PeproTech

Human HGF

100-39

2ug/10ug

PeproTech

Human/Murine/Rat Activin A

120-14

2ug/10ug

PeproTech

Human FGF-4

100-31

5ug/25ug

PeproTech

Heregulinβ-1

100-03

10ug/50ug

PeproTech

Human R-Spondin 2

120-43

5ug/20ug

PeproTech

Human/Murine/Rat BMP-2

120-02

2ug/10ug

PeproTech

Human BMP-7

120-03P

2ug/10ug

PeproTech

Human FGF-9

100-23

5ug/20ug

PeproTech

DKK-1

120-30

2ug/10ug

PeproTech

Human/Murine/Rat BDNF

450-02

2ug/10ug

PeproTech

Human GDNF

450-10

2ug/10ug

PeproTech

SHH

100-45

5ug/25ug

absin

A 83-01

abs47028218

2mg/5mg/10mg/25mg

absin

Gastrin

abs45150387

1mg

absin

Nicotinamide

abs42023504

100g/500g

absin

SB 202190

abs810009

5mg/10mg/25mg/50mg/100mg

absin

Y 27632

abs812864

2mg/5mg/10mg/50mg

absin

DAPT

abs810473

5mg/10mg/50mg

absin

Forskolin

abs810050

5mg/10mg/25mg/50mg/100mg

absin

Prostaglandin E2

abs44129498

10mg/100mg

absin

CHIR 99021

abs810052

5mg/10mg/25mg

absin

SB 431542

abs810481

5mg/10mg/50mg/100mg

absin

Prolactin

abs01322

10ug/50ug/1mg

absin

Retinoic Acid

abs42026621

500mg/5g

absin

MK-2206

abs810621

5mg/10mg/50mg/100mg

absin

GDC-0068

abs810633

5mg/10mg/50mg/100mg

absin

Dorsomorphin

abs810529

5mg/10mg/50mg/100mg

 

 

 

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